旋光度測定法

中國藥典2020版四部-通則0621

　　平面偏振光通過含有某些光學活性化合物的液體或溶液時，能引起旋光現象，使偏振光的平面向左或向右旋轉。旋轉的度數，稱為旋光度。在一定波長與溫度下，偏振光透過每 1ml 含有 1g 旋光性物質的溶液且光路為長 1dm 時，測得的旋光度稱為比旋度。比旋度（或旋光度）可以用于鑒別或檢查光學活性藥品的純雜程度，亦可用于測定光學活性藥品的含量。

　　在空間上不能重疊，互為鏡像關系的立體異構體稱為對映體。手性物質的對映異構體之間，除了使平面偏振光發生偏轉的程度相同而方向相反之外，在非手性環境中的理化性質相同。生物大分子如酶、生物受體等通常為手性物質，總是表現出對一種對映體的立體選擇性，因此，對映體可在藥理學與毒理學方面有差異。來源于自然界的物質，例如氨基酸、蛋白質、生物堿、抗體、糖苷、糖等，大多以對映體的形式存在。外消旋體一般由等量的對映異構體構成，旋光度凈值為零，其物理性質也可能與其對映體不同。
　　最常用的光源是采用鈉燈在可見光區的 D 線（589.3nm），但也使用較短的波長，如光電偏振計使用濾光片得到汞燈波長約為 578nm、546nm、436nm、405nm 和 365nm 處的最大透射率的單色光，其具有更高的靈敏度，可降低被測化合物的濃度。還有一些其他光源，如帶有適當濾光器的氙燈或鹵鎢燈。
　　除另有規定外，本法系采用鈉光譜的 D 線（589.3nm）測定旋光度，測定管長度為 1dm（如使用其他管長，應進行換算），測定溫度為 20℃。用讀數至 0.01° 并經過檢定的旋光計。
　　旋光度測定一般應在溶液配制后 30 分鐘內進行測定。測定旋光度時，將測定管用供試液體或溶液（取固體供試品，按各品種項下的方法制成）沖洗數次，緩緩注入供試液體或溶液適量（注意勿使發生氣泡），置于旋光計內檢測讀數，即得供試液的旋光度。使偏振光向右旋轉者（順時針方向）為右旋，以“+”符號表示；使偏振光向左旋轉者（反時針方向）為左旋，以“-”符號表示。用同法讀取旋光度 3 次，取 3 次的平均數，照下列公式計算，即得供試品的比旋度。
　　對液體供試品

　　對固體供試品

　　式中 [α] 為比旋度；
　　D 為鈉光譜的 D 線；
　　t 為測定時的溫度，℃；
　　l為測定管長度，dm；
　　α 為測得的旋光度；
　　d 為液體的相對密度；
　　c 為每 100ml 溶液中含有被測物質的重量（按干燥品或無水物計算），g。
　　旋光計的檢定，可用標準石英旋光管進行，讀數誤差應符合規定。
　　【注意事項】　�。�1）每次測定前應以溶劑作空白校正，測定后，再校正 1 次，以確定在測定時零點有無變動；如第 2 次校正時發現旋光度差值超過 ±0.01 時表明零點有變動，則應重新測定旋光度。
　�。�2）配制溶液及測定時，均應調節溫度至 20.0℃±0.5℃（或各品種項下規定的溫度）。
　�。�3）供試的液體或固體物質的溶液應充分溶解，供試液應澄清。
　�。�4）物質的旋光度與測定光源、測定波長、溶劑、濃度和溫度等因素有關。因此，表示物質的旋光度時應注明測定條件。
　�。�5）當已知供試品具有外消旋作用或旋光轉化現象，則應相應地采取措施，對樣品制備的時間以及將溶液裝入旋光管的間隔測定時間進行規定。