化妝品中氯苯甘醚的檢測方法

1   適用范圍

本方法規定了測定化妝品中氯苯甘醚的高效液相色譜法。

本方法適用于膏霜、乳、液、粉類化妝品中氯苯甘醚的含量測定。

2  方法提要

氯苯甘醚在280nm處有特征吸收，以甲醇＋水＝55＋45提取化妝品中的氯苯甘醚，用高效液相色譜分離，并根據保留時間和紫外光譜圖定性，峰面積定量。本方法中氯苯甘醚的檢出限為3ng、定量下限為10ng；取0.5g樣品時的檢出濃度為6mg/g，最低定量濃度為20mg/g。

3  試劑和材料

除另有規定外，所用試劑均為分析純，水為一級實驗用水。

3.1  甲醇，色譜純。

3.2  氯苯甘醚，對照品，純度99.5%。

3.3  標準儲備溶液1（r＝1000mg/L）：稱取氯苯甘醚約0.05g（精確到0.0001g）于小燒杯中，加入甲醇，超聲溶解后轉移至50mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，搖勻，配成濃度約為1000mg/L的標準溶液。

3.4  標準儲備溶液2（r＝50mg/L）：移取標準儲備溶液1（3.3）5.00mL至100mL容量瓶中，甲醇定容至刻度，搖勻，配成濃度約為50mg/L的標準溶液。

3.5  系列濃度標準工作溶液：分別移取標準儲備溶液2（3.4）0.20mL、1.00mL、2.00mL、10.0mL和標準儲備溶液1（3.3）1.00mL 、2.50mL、5.00mL于10mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。此時溶液中組分的濃度分別為 1 mg/L、5 mg/L、10mg/L、50 mg/L、100 mg/L、250 mg/L和500 mg/L。

4  儀器和設備

4.1  高效液相色譜儀，具有二極管陣列檢測器，配色譜工作站。

4.2  超聲波清洗器。

4.3  離心機。

4.4  天平，感量0.0001g。

5  測定步驟

5.1  樣品預處理

稱取樣品約0.5g（精確至0.0001g）于10mL具塞比色管中，加入少量流動相，渦旋振搖1min，補流動相至刻度，超聲提取30min，渾濁樣品可取適量5000rpm離心5min。經0.45mm濾膜過濾，濾液作為待測樣液備用。

5.2  測定

5.2.1  色譜參考條件

    色譜柱： C₁₈ 柱，250mm×4.6mm，5mm；

    流動相：甲醇+水=55+45；

    流速：1.0mL/min；

檢測器：二極管陣列檢測器，檢測波長為280nm；

柱溫：25℃。

5.2.2  校準曲線的制備

在設定色譜條件下，分別取系列濃度標準工作溶液（3.5）10mL進行高效液相色譜分析。根據標準工作溶液的質量濃度和峰面積，繪制校準曲線。

5.2.3  樣品測定

在設定色譜條件下，進10mL待測樣液進行高效液相色譜分析。色譜圖檢出的物質，經與該物質對照品的保留時間和紫外光譜圖比較確證后，根據峰面積，從校準曲線上獲取相應組分的質量濃度。若待測樣液中氯苯甘醚的質量濃度超過了校準曲線線性范圍的上限，需對待測樣液進行適當稀釋。

5.2.4  平行實驗

    按以上步驟，做兩份樣品的平行測定。在重復性條件下獲得的兩次獨立測試結果的絕對差值不大于這兩次測定值的算術平均值的10%。

6  計算

                           D ′ r ′ V

w（氯苯甘醚）= —————— ×10^-4

                             m

式中：w（氯苯甘醚）——化妝品中氯苯甘醚的質量分數，%；

r —— 從校準曲線上查得的待測樣液中氯苯甘醚的質量濃度，mg/L；

V —— 樣品定容體積，mL；

m —— 樣品取樣量，g；

D —— 稀釋倍數（不稀釋則取1）。

7  回收率和精密度

經多家實驗室驗證，氯苯甘醚的方法加標回收率在85%～105%之間，相對標準偏差在0.2%～2.2%之間。

8  色譜圖

圖1  氯苯甘醚標準溶液色譜圖(7.116min)